大紅蟹品牌官網訊：羧甲基殼聚糖是殼聚糖羧甲基化的衍生物,因其良好的水溶性而得到廣泛應用以及深入研究。
研究表明,羧甲基殼聚糖具有促進創傷愈合的作用,并且常常伴隨著低水平的疤痕形成及良好的愈合表觀。細胞及分子水平的研究表明,該現象很可能與羧甲基殼聚糖通過合理調控創傷處膠原合成和分泌有關。
另外,有研究表明羧甲基殼聚糖促進傷口愈合的作用與其分子量的大小密切相關。迄今為止,關于羧甲基殼聚糖愈創方面的研究主要停留在對愈創效果的描述,對于深入的機理探討鮮有報道。
本課題擬在本實驗室前期工作基礎上,繼續就羧甲基殼聚糖促進創傷愈合方面作更深入的研究。 方法:利用酶解法獲得不同分子量的羧甲基殼聚糖,分別在動物個體水平和細胞水平研究其促進傷口愈合的作用,并對內在機理進行初步探討。
動物體內實驗通過大鼠背部深Ⅱ度燒傷模型研究羧甲基殼聚糖對傷口愈合的促進作用。用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒測定皮膚傷口處的轉化生長因子(TGF)-β1,白細胞介素(IL)-6和基質金屬蛋白酶(MMP)-1的含量。體外細胞實驗主要研究羧甲基殼聚糖對傷口重塑的兩種重要的修復細胞——成纖維細胞和巨噬細胞的影響。成纖維細胞可以形成肉芽組織、合成前膠原和糖氨聚糖等細胞外基質,同時還可自分泌生長因子調控修復過程。
巨噬細胞能吞噬并清除外源性異物和壞死細胞,還能通過釋放各種細胞因子調節創傷修復。創傷后,巨噬細胞功能的改變將會影響創面修復。在體外細胞實驗中,用MTT法研究了羧甲基殼聚糖對成纖維細胞增殖的影響,用中性紅法檢測羧甲基殼聚糖對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬能力的影響。ELISA試劑盒測定了成纖維細胞分泌的白細胞介素(IL)-8,IL - 10和羥脯氨酸的含量以及巨噬細胞分泌的腫瘤壞死因子(TNF)-α的含量。
結果:動物實驗表明,不同分子量的羧甲基殼聚糖均可以顯著促進大鼠深Ⅱ度燙傷創面的愈合過程,顯著縮短愈合時間(P0.01)。與對照組比較,羧甲基殼聚糖能夠顯著提高傷口處MMP - 1含量,且羧甲基殼聚糖組TGF-β1和IL -6水平顯著升高。細胞水平實驗表明,不同分子量的羧甲基殼聚糖都可以促進成纖維細胞的增殖,且分子量越小,促增殖作用越強。羧甲基殼聚糖在不同培養時間分別刺激成纖維細胞分泌IL - 8和IL - 10,但對膠原的分泌量并沒有影響。IL-8被認為可以抑制成纖維細胞合成和分泌膠原。IL-8含量的變化對于調控膠原的適度分泌有重要意義。
在與成纖維細胞共培養前期,羧甲基殼聚糖促進IL-10的分泌,作為一個重要的抗炎癥因子,IL-10含量的提高對于調控或消除創傷處的炎癥反應有重要意義。羧甲基殼聚糖還可以增強巨噬細胞的吞噬能力,并提高其對TNF-α的分泌。
結論:羧甲基殼聚糖能夠促進成纖維細胞增殖,激活巨噬細胞,提高TGF-β1和IL- 6的含量,從而促進傷口愈合。羧甲基殼聚糖通過刺激成纖維細胞分泌IL-8,巨噬細胞分泌TNF-α和在皮膚傷口處提高MMP-1減少膠原分泌,這有助于減少疤痕的形成。羧甲基殼聚糖刺激成纖維細胞產生的IL-10與調控炎癥反應有關。